Meta bosqich diagnostikasi uchun bakteriologik usul. Bakteriologik usullar
Kuzatishning madaniy (bakteriologik) usuli - bu hayot beruvchi muhitlarda qo'shimcha etishtirish uchun mikroorganizmlarning (bakteriyalarning) sof kulturalarini kuzatish va aniqlashga yo'naltirilgan usullarning kombinatsiyasi.
Sof madaniyat - bu bir turdagi mikroorganizmlarning to'plami. Ko'pincha sof madaniyat izolyatsiya qilingan koloniyani tanlash va etishtirish yo'li bilan chiqariladi (bitta mikrob hujayrasining tarqalishi).
Usulga qadamlar:
1. Kuzatuv uchun materialni oling.
2. Sof madaniyat va identifikatsiyani ko'rish.
3. Visnovok.
Kuzatuv uchun materialni oling. Depozitga qo'yiladigan materialning turi tekshiruv turiga bog'liq (tashxis - kasal odamda; epidural tahlil - sog'lom muhitdan, oziq-ovqat mahsulotlaridan, kasallik va (yoki) bakterionozlikdan).
Sof madaniyatga qarash. 3 yoki 4 bosqichni o'z ichiga oladi:
1. Materialni (oldingi mikroskopdan keyin) koloniyalarni ajratish usuli bilan yupqa hayot beruvchi (aniqrog'i differentsial-diagnostik yoki selektiv) muhitga ega idishga ekish. Ko'pincha mexanik rozet usuli bilan tebranadi. Ba'zi hollarda (masalan, boshpana), material agar muhiti bo'lgan stakanga oldindan o'tkazish bilan boyitilgan noyob muhit oldida ekilgan. Ba'zan, ekishdan oldin, materialni tanlab qayta ishlash amalga oshiriladi (ko'rinadigan mikroorganizmning kuchini yaxshilash uchun; masalan, kislota bilan ishlov berish - chidamli bakteriyalarni ko'rishning eng yaxshi usuli). 18-24 yil davomida 37 ° S haroratda o'stiring. Har xil turdagi bakteriyalar uchun bir soat o'stirish kümülatif bo'lishi mumkin.
2(3): a) agar plastinkalarida o'sayotgan koloniyalar (madaniy belgilar), eng tipik; b) ushbu koloniyalardan infektsiyalardan smear tayyorlash (Gram yoki boshqa usullar uchun); a) optimal haroratda termostatda to'planish va o'sishning o'rtasiga o'rnatilgan koloniyaning ortiqcha miqdorini kiritish.
3(4). Vivchennya poklik madaniyati, otrimanoí̈ o'rtacha to'planishi. Narxi uchun
smear tayyorlash usuli yordamida, farbuyut (ko'pincha Gram uchun), mikroskopik to'qish
morfologik va tinktorial bir xillik (turli sohalarda zoru).
4(5). Sof madaniyatni aniqlash.
Visnovok. Konsistensiya uchun mos yozuvlar (odatiy) shtammlarning kuchi bilan o'xshashlik belgisi materialdan ko'rinadigan mikroorganizm turi bilan ko'rsatiladi.
Usulni baholash:
afzalliklari: aniq yuqori sezuvchanlik va aniqlik, tahlil qilinadigan materialdagi mikroblar sonini aniqlash qobiliyati, shuningdek antibiotiklarga nisbatan sezgirlik; kamchiliklar: ko'rinadigan trivalite, usul qimmat.
21. Aeroblar va anaeroblar uchun tirik muhit. Vimogi hayotning o'rtasiga, tasnifi.
Wimogi:
1. aybning oraliqlari, lekin hayot
2. onaga qarzdormiz pevn ph
3. Mayut izotonik, tobto. o'rtadagi osmotik vitse aybdor, lekin u klitsdagi kabi.
4. aybdor butiologik va juda kam emas
5. ayblash
6. steril bo'lishi kerak
7. birlashmoq, tobto. qasos post_yni kílkosti okremih íngredíêntív.
O'rtaning hayotini qo'shish mumkin:
A) sayohatlar uchun:
1) tabiiy - tabiiy oziq-ovqat mahsulotlari (go'sht, sut, kartoshka);
2) bo'laklar - mikroblarni etishtirish uchun maxsus tayyorlangan: - tabiiy mahsulotlardan olingan muhitlar (go'shtli suv, go'shtli peptonli bulon (MPB), m'ya peptonli agar (MPA), - doimiy omborda qolib ketmaslik uchun; - sintetik; hayotni ta'minlovchi vositalar - distillangan suvdagi tuzlar, aminokislotalar, azotli asoslar, vitaminlarning qat'iy teng miqdorda chakana savdosi - doimiy omborga ega bo'lishi mumkin, ular vaktsinalar, immun siroplar va antibiotiklarni olib tashlash bilan mikroorganizmlar va klitin kulturalarini etishtirish uchun xizmat qiladi;
B) tan olish uchun:
1) yovvoyi tanib olish (MPB, MPA) - ular ko'proq mikroblarni o'sadi;
2) selektiv - sumishdan mikroblarning bir turini titrash (masalan, stafilokokklar uchun jovtkovo-tuzli agar);
MAVZU: Sterilizatsiya, aseptika, antisepsis, dezinfeksiya.
Mikroorganizmlarni etishtirish va sof kulturalarni kuzatish tamoyillari, usullari.
Bakteriologik kuzatish usuli. 1 bosqich.
1. Mikrobiologiya va tibbiyotda qo’llaniladigan dezinfeksiya va sterilizatsiyaning asosiy usullari bilan tanishing.
2. Mikroorganizmlar almashinuvining o`ziga xos xususiyatlarini, ularni laboratoriya ongida o`stirish tamoyillarini bilish.
3. Yuqumli kasalliklarni aniqlashning bakteriologik usulining 1-bosqichini o'rganing.
1. Hayotiy muhitlar, laboratoriya idishlari, tibbiy asboblarni sterilizatsiya qilish usullari, qo'llanilishi va usullari.
2. Dezinfektsiyalash vositalarining asosiy guruhlari, ularning ta'sir qilish mexanizmlari, yuqtirish sohasi va usuli.
3. Mikrobiologik amaliyotda hayot beruvchi muhitni tayinlash.
4. Mikroorganizmlarning sof kulturalarini qabul qilish tamoyili va yuqumli kasalliklar diagnostikasida bakteriologik usulning “oltin standart” sifatidagi ahamiyati.
5. Mikroorganizmlarning sof kulturalarini ko`rishning bakteriologik usulining 1-bosqichi meta va ketma-ketligi.
1. O'zingizni tanlang, sterilizatsiya va dezinfeksiya rejimi ma'lum sanalarga qadar mos keladi.
2. Mikrobiologik amaliyotda turg'un bo'lgan, taklif qilingan hayot beruvchi muhitni tavsiflang.
3. Aerob mikroorganizmlarning sof kulturasini ko`rishning bakteriologik usulining 1-bosqichini bajaring.
Oziqlanishni nazorat qilish:
1. Mikroorganizmlarda past va yuqori haroratni bakteriostatik va bakteritsid bilan nazorat qilish.
2. Mikroorganizmga turli sinflarning kimyoviy nutqlari oqimi. Antiseptiklar va dezinfektsiyalash vositalari.
3. Tushunchalar: sterilizatsiya, dezinfeksiya, aseptika, antisepsis.
4. Sterilizatsiya qilish usullari, jihozlari va rejimlari, ularni sterilizatsiya qilinayotgan ob'ekt vakolatiga qarab tanlash.
5. Dezinfektsiyalash vositalarining asosiy guruhlari va ularni LPZda tiqilib qolish taktikasi.
6. Mikroorganizmlarni yetishtirish usulining printsipi.
7. O'rtadagi hayot: tushunish; ularning oldida wimogi; tasnifi.
8. Mikroorganizmning turi, shtammi, koloniyasi, sof kulturasi haqida tushuncha.
9. Yoga tadqiqotining ushbu sohasida bakteriologik usulning mohiyati.
10. Aerobikani kuzatishning bakteriologik usulining 1-bosqichi meta va kuzatish ketma-ketligi.
Ish vaqti uchun hisoblangan vazifalar (UIRS):
1. Tibbiyot va mikrobiologik amaliyotda sterilizatsiya uchun qo'llaniladigan aksessuarlar bilan tanishing: bug'li sterilizator (avtoklav), Paster pechi.
2. Hayot beruvchi vositalar, laboratoriya idishlari, tibbiy asboblar uchun aksessuarlar va sterilizatsiya rejimlarini tanlang.
3. Tibbiyot va mikrobiologik amaliyotda qo'llaniladigan dezinfektsiyalash vositalaridan xabardor bo'ling. Proponentlangan ob'ektlar uchun dezinfektsiyalash va dezinfektsiyalash rejimini tanlang.
4. Mikrobiologik amaliyotda qo'llaniladigan turli xil hayot beruvchi muhitlar bilan tanishing, ularning saqlanishi, mustahkamligi va tan olinishi uchun xarakteristikalarini bering.
5. Aeroblarning sof kulturalarini ko`rishning bakteriologik usulining 1-bosqichini o`tkazing:
5.1. O'rganilayotgan materialdan fiksator preparatini tayyorlash, Gramga tayyorgarlik ko'rish, morfologik va tinktorial kuchlar uchun mikroorganizmlarning namoyon bo'lishini aniqlash.
5.2. "Maydanchikdan zarba" usuli yordamida materialni kuzatib boring.
5.3. Posíyati doslydzhuvannya material Drigalskiy usuli (namoyish).
6. Patologik materiallarni olish va tashish uchun asboblar to'plami bilan tanishing.
Yakuniy vazifa tugagunga qadar uslubiy bayonotlar:
1. Sterilizatsiya uchun qo'llaniladigan aksessuarlar bilan tanishish: bug'li sterilizator (avtoklav), Paster pechi.
1.1. Bug 'sterilizatori (avtoklav) - tirgak ostida bug' sterilizatsiyasi.
Tibbiy va mikrobiologik amaliyotda sterilizatsiyaning eng ilg'or va universal usuli - bu bug 'sterilizatsiyasi. Ular avtoklavda tebranadi, sterilizatsiya qilingan narsalar atmosfera bosimi ostida boy bug 'bilan isitiladi. Bosim o'lchagichning ko'rsatkichlari va ko'tarilgan bug 'harorati o'rtasida eskirish paydo bo'ladi:
Nolinchi vise bilan oddiy atmosfera vise (760 mm Hg) hisobga olinadi.
Sterilizatsiya faqat avtoklavni to'g'ri saqlash va maxsus o'qitilgan xodimlar tomonidan boshqarilsa, erishish mumkin. Shuning uchun sterilizatsiya rejimini doimiy ravishda kuzatib borish kerak, bu fizik (maksimal termometr va in.), Biologik (mikroorganizm sinov madaniyatlarining sporalari bilan biotest) va kimyoviy (kimyoviy testlar, IC ko'rsatkichlari turi) usullari bilan amalga oshiriladi.
Avtoklavlarning sterilizatsiya rejimini nazorat qilish avtoklavning teriga ta'sir qilish soati ostida kimyoviy usul bilan amalga oshiriladi. Kimyoviy sinov - erish nuqtasini o'lchash mumkin bo'lgan kimyoviy rexovinali shisha naycha: antipirin, rezorsin - 110 ± 1 °, benzoik kislota - 120 ± 2 °, benzamid - 126 ± 1 °, sechovin, nikotinamid, D (+) -mannoz - 13±2°. Kimyoviy sinovlar omboriga anilin barvnikini (magenta, gentian binafsha va boshqalar) kiriting, ular yogo erishi paytida nutqni bir tekisda zabarvlyue qiladi. Daniyada ko'pincha ÍS tipidagi ko'rsatkichlar ("Vinar" firmasi, Rossiya) eng ko'p qo'llaniladi, ular qog'ozning xotinini ifodalaydi va unga nafaqat operativ vizual nazoratni ko'rsatadigan ko'rsatkichlar to'pi bilan qo'yiladi. harorat, lekin sterilizatsiya soati (IIS-120, ÍS-132). Har chorakda sterilizatsiya rejimini nazorat qilish vikariy biotest va test-kultura sporalari bilan amalga oshiriladi. Bacillus stearotermophilus BKM B-718
1.2. Pecti Pasteur - quruq issiqlik sterilizatsiyasi.
Paster pechida ular silikon kauchuk asosidagi po'lat jun, metall va saqich bilan sterilizatsiya qilinadi. Sterilizatsiya rejimi: 160 ° C - 150 daqiqa; 180 ° C - 60 min. Teri siklini sterilizatsiya qilish rejimini nazorat qilish sterilizatsiyaning qo'shimcha ko'rsatkichlari ÍS-160, ÍS-180; har chorakda - test-kultura sporalari bilan g'olib biotest bilan Bacillus licheniformis PCS. G BKM B-1711
2. Saqlash uyda jadval raqami 1.
1-jadval
Sterilizatsiya
3. Dezinfektsiyalash vositalari bilan tanishing va esda tuting band jadval No 2, vikoristovuyuchi qo'shimchalar No 1, 2.
2-jadval
Dezinfektsiya
4. Hayot beruvchi vositalar bilan tanishing va esda tuting band jadval No 3 "O'rtadagi hayot".
3-jadval
5. Klinik mikrobiologiya tibbiy mikrobiologiyaning bo'limi sifatida ikkita asosiy vazifani inkor etadi: yuqumli kasallikning etiologik diagnostikasi va etiotrop terapiyani oqilona tanlash.
Mikrobiologik diagnostikaning asosiy usuli, bu sizga virishiti tsí zavdannya, ê imkonini beradi bakteriologik usul. Bakteriologik usulning mohiyati mikroblarga qarshi preparatlarga sezgirligi tufayli ilonning sof madaniyatini kuzatishga asoslangan.
Tayyor materialni tanlash kasallik shaklida yotadi va rivojlanishning qo'shiq bosqichida kasallikning eng muhim lokalizatsiyasi (patogenez). Materiallar qon, suyuqlik, erta bo'shatish, balg'am, deformatsiya, kesish va boshqalar bo'lishi mumkin. Materialni olish texnikasi ishonchli natija olish uchun katta ahamiyatga ega bo'lishi mumkin.
Sof madaniyatni ko'rishning muvaffaqiyati to'g'riligi bilan belgilanadi hayot beruvchi vositani tanlash va etishtirish aqllari. Har qanday mavjud materialdan mikroorganizmlar mavjudligini ko'rishga imkon beradigan universal hayot beruvchi vosita yo'q. Shuning uchun, mumkin bo'lgan sog'lig'ining fiziologik xususiyatlarini yaxshilash uchun materialni o'rtadagi yashash xonasiga yoki tirik o'rta kompleksiga (maxsus, tanlangan, differentsial diagnostika) ekish kerak. Muayyan mikroorganizmlar uchun maxsus aql va o'stirish (anaerob, mikroaerofil, karbonat kislotasini kiritish bilan) bo'lishi kerak.
Kasal odamda patologik material ko'pincha mikroorganizmlarning yig'indisiga olib keladi. At zv'yazku z zim zavdannyam ê í̈x roses'êdnannya deb izolyatsiya qilingan koloniyalarni olib tashlash. Koloniya ajratilgan, sof kultura rivojlanishining asosi bo'lgan va bir turdagi hujayradan hosil bo'lgan bitta mikrob hujayrasining ko'payishi natijasida. Mikrobiologik amaliyotda vikorist koloniyalarni izolyatsiya qilishning turli usullariga ega. Ko'pincha shunday vikoristovuyutsya:
1. Yakuniy materialni yuborish "insult íz maydanchik" usuli bilan- yakuniy materialni tirqishli bo'shliq yuzasiga surting, so'ngra uni qisman parallel zarbalar bilan ekish yo'li bo'ylab yoying.
2. Drigalskiy usuli- birinchi stakanga hayot beruvchi vosita bilan surtiladigan va qo'shimcha spatula uchun qo'llaniladigan material, spatulaning o'zi bilan ketma-ket ekilgan, uni 1-2 stakan sterilizatsiya qilmasdan.
3. Tarmoqli hisob-kitoblar usuli- Yakuniy material bir halqa bilan ketma-ket sektorlar bo'ylab ekiladi. Tsomu pevna tekhnika sivu (usul gul) nafaqat koloniyaning izolyatsiyasini bartaraf etish, balki ruhiy patogen mikroorganizmlarning (MPM) etiologik rolini baholashda muhim bo'lishi mumkin bo'lgan 1 ml (g) qo'shilgan materialda mikroorganizmlar sonini aniqlash imkonini beradi.
5.1.Aerobikani kuzatishning bakteriologik usulining 1-bosqichini o'tkazish:
Yig'ilgan materialdan fiksator preparatini tayyorlang, Gram usulidan foydalaning, mikroskopiya qiling, morfo-tinktorial kuchlar uchun mikroorganizmlarning namoyon bo'lishini aniqlang; Mikroorganizmlar soniga e'tibor bering. Protokol natijalarini yozib oling va visnovok qiling;
· "maydondan zarba" usuli yordamida yurak shaklidagi hayot beruvchi vosita bilan yarim chashka ustiga pardozlash materialini qo'ying;
· Drigalskiy usuli (namoyish) yordamida hayot beruvchi vosita bilan uchta stakanga qo'shimcha material qo'yish;
Ekish sanasini ko'rsatgan holda stakanlarga imzo qo'ying va ularni 18-24 yil davomida 37 ° normal haroratda termostatga teskari qo'ying.
6. Patologik materialni yig'ish va etkazib berishni tashkil etish
Eslatma: * - bir vaqtning o'zida vikorist, 1,5-2 yil qayta ko'rib chiqilgandan keyin materialni laboratoriyaga etkazib berish muddati sifatida.
O'z-o'zini nazorat qilish uchun ovqatlanish:
1. Mikroorganizmlarni yetishtirish tamoyillarini nomlang va belgilang.
2. Nima uchun sivbí patologik material bo'lsa, selektiv, differentsial-diagnostik vositalar va ommaviy axborot vositalarining to'planishi mavjud.
3. Sof mikroorganizm kulturalarini yo'q qilish tamoyilini ochib bering.
4. Nima uchun bakteriologik usul yuqumli kasalliklarning mikrobiologik diagnostikasi uchun “oltin standart” hisoblanadi?
5. Mikroorganizmlarning sof kulturalarini olishning kimyoviy va biologik usullari nima uchun asoslanadi?
6. Nima uchun dezinfektsiyalash vositasi sifatida sterilizatsiyani afzal ko'rasiz?
7. Sterilizatsiya va dezinfeksiyaning mikrobiologik va tibbiy amaliyotda tan olinishini tushuntirib bering.
8. Sterilizatsiya rejimi nazorati ostida termoindikator tizimlarini tanlashning ustuvorligini Obgruntuyut (Rossiya "Vinar" kompaniyasining IC ko'rsatkichining ko't qismida).
Adabiyot:
Yordamchilar:
1. Borisov L. B. Tibbiy mikrobiologiya, virusologiya, immunologiya. - M.: TOV "MIA", 2002. - S. 26-29, 63-66, 150-159.
2. Pozdyoev O. K. Tibbiy mikrobiologiya / Ed. akad. RAMS V.I. Pokrovskiy. - M: GEOTAR Medicine, 2001. - S. 76-77, 126-130, 253-265.
Dodatkov adabiyoti:
1. Robotlarning mikroorganizmlar bilan xavfsizligi III - IV patogenlik guruhlari va gelmintlar: Sanitariya qoidalari. - M .: Rossiya Sog'liqni saqlash vazirligining Sog'liqni saqlash va epidemiologik monitoring federal markazi, 1999. - 107p.
Mikrobiologiya bo'yicha ma'ruzalar.
Testi.
Bakteriologik (madaniy) usul
hayot beruvchi muhitda mikroorganizmlarni parcha-parcha etishtirish usullarini yuqumli kasallik yoki mikroblar keltirib chiqaradigan boshqa jarayon va past fiziologik sv-in k-ri belgilashda ularni aniqlash usuli bilan kombinatsiyasi . maqsadlar, masalan, kimyoterapiya preparatini tanlashda. Ko'proq biol etishtirishning zamonaviy usullari. Aniqlik uchun bakteriyalardagi St sof k-ri(Div.). Kontaminatsiya to-ri ín. mikroblarning turi, qoida tariqasida, natijalar va noto'g'ri vysnovka yaratishga olib keldi. Buning uchun korxona rahbari B.m. ê otrimannya sof to-ri har qanday turdagi (vara) mikrobial assotsiatsiyalardan va kuzatuvning barcha bosqichlarida ushbu mikrobial to-ri kuzatuvi uchun uchinchi tomon mikroflorasi materiallari bilan ifloslanishining oldini olish. Bu materialni steril idishlardan steril lavabolarga olish, steril asbob bilan steril muhitga joylashtirish, etkazib berish jarayonida mikroblarning qayta kirishiga yo'l qo'ymaslik, bu materialni inkubatsiya qilish va tirik muhitni emlashda mumkin. Boshqa menejer B.M. - mikroblarni aniqlash(div.) ko'rgan sof to-ri, uchinchi - qo'shimcha avliyolar belgilash, masalan, antibiotiklar uchun sezgirlik, virulentlik. B.m. bosqichlari: 1) materialni oling (div. Kuzatuv uchun materiallar) bakteriyalarda yoga yetkazib berish. laboratoriya; 2) mikroskop material (div. Bakterioskopik usul). Ushbu bosqich ko'pincha g'alaba qozonmaydi, garchi kamroq sezgirlikdan qat'i nazar, oldingi mikroskopiya ketma-ket vypadkív uyg'otuvchi qo'ng'iroq haqida orientatsiya ma'lumotlarini beradi va o'rta haqida kerakli ma'lumotlarni tanlash imkonini beradi; 3) so'zma-so'z tarjima. jismoniy material. chi kimyo. vidallennya chi zmenshennya 3-partiya mikroflorasi usuli uchun omillar. Butun dunyo turg'unlashadi, masalan, uzoq muddatli balg'am bilan, kislotaga chidamli va spora hosil qiluvchi mikroblarni ko'radi; 4) posív isl. material (div. Pozivi bakteriologik) alohida koloniyalarga egalik qilish uchun turar-joy binolarida; 5) tirik muhitlarning ko'chatlarini inkubatsiya qilish. Kuluçka muddati va harorati k-ry ga tegishli bo'lgan to'plamdan oldingi turlarga bog'liq. Termostatni 1-2 kun davomida 37 ° C da tebranishni boshlang. Albatta, inkubatsiya muddati 2-3 kunga uzaytirilishi mumkin. Ko'proq inkubatsiya sinovlari bilan muhitni osib qo'ymaslik kerak, buning uchun u suv bilan eksikatorga joylashtiriladi yoki probirkalarning tiqinlari kerosin bilan to'ldiriladi; 6) kuzatish koloniyalar(Div.). O'simliklar uchun, kubokning chetidan uzoqda va pastadir zarbasi bilan tarqalgan bir xil izolyatsiyalangan koloniyalarni tanlang, ularni guruch bilan qoldiring, ularni raqamlang. Agar kuzatuv yo'naltirilmagan (polietiologik jarayon va in.) amalga oshirilsa, vizual tekshirish natijalariga ko'ra, stakanda aniq ko'rinadigan barcha turdagi 2-3 ta koloniyalarni tanlang va undan surtma qiling. ular; 7) tanlangan koloniyalardan to'planish muhitiga o'tkazish. Buning uchun koloniyaning haddan tashqari ko'pligi, smearda, u infektsiyalangan bakteriyalarning shakliga ko'ra bir xil bo'ladi, sudo koloniyasini ushlamaslikka harakat qiladi, koloniyaning bir qismini oladi va MPA namunalarida egilgan joylarga ekish yoki. maxsus o'rta zarba; 8) o'sadigan o'sish paydo bo'lgunga qadar termostatni inkubatsiya qilish (1-2 kunni chaqirish); 9) to-ri qiyshiq o'rtalarida virusning tozaligini makroskopik ko'rinish bilan belgilash va yangi smearning mikroskopiyasi; 10) Ko'rilgan toza to-rini aniqlash va iste'mol qilishning turli vaqtlarida (klinisyen, epidemiologning yordami uchun) turli biollarni tayinlash. sv-in; 11) ko'rilgan k-ri va vv sv-vahning turlarga mansubligi haqida vysnovok. Visnovok raqam so'rovi bilan rasmiy blankada beriladi, k-ra jinoyati ostida laboratoriya jurnalida ro'yxatga olinadi. B.M. ê d-tsidagi asosiy bakteriya. infektsiyalar. Vín, qoida tariqasida, yuqori sezuvchanlikka ega, bu s, ísl ni ko'rish imkonini beradi. materiali sof to-ru, yetarli dozada ham singdirish uchun materialga o'nlab ixtisosliklarga sepilgan. B.M. uchun. yuqori o'ziga xosligi bilan ajralib turadi. Past aqlni o'rganish uchun patologik materialdan bakteriyalarning bu har xil turlarini ko'rish (div. Kasallik signalizatsiyasi) Nadiano patologik jarayonning etiologiyasini belgilaydi. Vignatok etyol maqsadida bakteriyalarning o'sha chi ynshoy biotop uchun ruhiy patogen autochthonous bo'lish. Bularning roli maxsus mezonlarga bo'lgan ehtiyoj, shuningdek, burun va kasallikni ajratish (masalan, streptokokk angina bilan burun difteriyasi) tomonidan olingan. Qiymati B.m. Men ham ishonamanki, bu yordam bilan, kimyoterapiya, seroterapiya, infektsiya sababining namoyon bo'lishi va signalni uzatish mexanizmlarini aniqlash uchun zarur bo'lgan Sankt-va o'rnatilishi mumkin, tanlov epidemiyaga qarshi yondashuvlar. Zreshtoyu, B.m. d-ki ning dastlabki usullariga keltirilishi. Nedoliki B. m. Mikroflora va y sv-vah ombori haqida ishonchli ma'lumotlar faqat yakuniy tanlov 3-10 kr bo'lsa olinishi mumkin.
Bakteriyalarni o'rganish odamlar uchun katta amaliy ahamiyatga ega bo'lishi mumkin. Shu kuni ko'p sonli prokariotlar aniqlandi, chunki ular patogenligi, tarqalish maydoni, shakli, hajmi, flagella soni va boshqa ko'rsatkichlar bo'yicha birma-bir ajralib turadi. Shtammlarni batafsil tekshirish uchun bakteriologik kuzatish usuli belgilanadi.
Qanday tozalash usullari?
Chi ê patogen bakteriyalarni aniqlash uchun turli usullar bilan kuzatish madaniyatini o'tkazing. Ular orasida:
1. Bakterioskopik usul.
2. Bakteriologik usul.
3. Biologik usul.
Bakterioskopik va bakteriologik asoslar to'g'ridan-to'g'ri prokaryotlarning klitinlari bo'lgan robotlarga asoslanadi, agar keyingi bir nechta jonzotlarning tirik organizmiga bunday klitinlarni kiritish uchun biologik tahlil zarur bo'lsa. Infektsiyaning tinchroq belgilarining namoyon bo'lish bosqichidan so'ng, siz namunalarda patogen bakteriyalar mavjudligi yoki mavjudligi haqida mo'ylovlarni o'stirishingiz mumkin, shuningdek ularni etishtirish uchun mavjudotlar organizmida va boshqa robotlarda tabiiy ravishda ko'paytirishingiz mumkin.
Bakteriologik usul bakterioskopik usul sifatida qaraladi. Birinchisi uchun tirik prokaryotlar madaniyati tahlil qilish uchun maxsus tayyorlanadi, agar ikkinchisi ob'ekt yuzasida o'lik yoki tirik hujayralar bilan ishlashi kerak bo'lsa.
Bakteriologik kuzatish usulining bosqichlari. Mikrobiologiya
Bakterial madaniyatning kuchini o'rnatish printsipi kelajakda ham mikrobiolog olimlar uchun, ham prokaryotik hujayralarni baholash uchun ham, laboratoriya assistentlari uchun ham bakteriyalarning patogenligi yoki patogen emasligini aniqlash uchun foydali bo'lishi mumkin. va keyin diagnostika
Bakteriyalarni etishtirish usuli uch bosqichga bo'linadi:
1. Birlamchi namunadan bakteriyalarni kuzatish.
2. Vysívannya bakteriyalar va viroshchuvannya vvchennya vv dominion.
Birinchi bosqich
Namuna yoki smear muhit yuzasidan yoki bemordan olinadi. Bu darajada, biz hayot beruvchi vositaga osilganlikda aybdordek, boy bakteriyalardan iborat "mexnat" olamiz. Ba'zan organizmdagi o'rta nuqtalarini bilib, kerakli bakteriyalarni ko'rish mumkin.
Ikki yoki uchta dobidan keyin kerakli koloniyalar olinadi va steril halqa yordamida Petri idishlarining qattiq o'rtasiga osib qo'yiladi. Boy laboratoriyalarda ular sinov naychalari bilan ishlaydi, bu erda qiyin yoki kamdan-kam hollarda hayot beruvchi markaz bo'lishi mumkin. Mikrobiologiyani kuzatish uchun bakteriologik usul shunday amalga oshiriladi.
Yana bir bosqich
Bakteriyalarning bir necha koloniyalari namunasi olingandan so'ng, oraliq bo'lmagan makro va mikrotahlil o'tkaziladi. Koloniyalarning barcha parametrlari nazorat qilinadi, terining rangi va shakli aniqlanadi. Petrning kosalarida, ya'ni tashqi materialda koloniyalarni mustamlaka qilishni amalga oshirish odatiy hol emas. Tse patogen bakteriyalarni tahlil qilishda muhim bo'lishi mumkin, masalan, infektsiyaning bosqichlarini yotish uchun.
Bakteriologik usul kuzatiladi, uning 2-bosqichi mikroorganizmlarning bir nechta koloniyalarini inokulyatsiya qilishda samaraliroq, bakteriyalarni biologik usulda tahlil qilish bilan bog'liq bo'lishi mumkin. Ushbu bosqichdagi yana bir meta ish - chiqish materiali miqdorini oshirish. Siz hayot beruvchi vositada ishlashingiz mumkin yoki tirik, tirik organizmlar ustida tabiiy aql bilan tajriba o'tkazishingiz mumkin. Patogen bakteriyalar ko'payadi va qonning noto'g'ri ishlashi natijasida prokaryotlarning millionlab hujayralari paydo bo'ladi. Olingan qondan bakteriyalarning kerakli ish materialini tayyorlash oson.
Uchinchi bosqich
Tadqiqotning eng muhim qismi bakterial madaniyatning morfologik, biokimyoviy, toksigenik va antigenik kuchlarini aniqlashdir. Ish hayot beruvchi muhitda "tozalangan" madaniyatlar, shuningdek mikroskop ostida preparatlar (ko'pincha infuzion) yordamida amalga oshiriladi.
Patogen yoki ruhiy patogen bakteriyalarning uchinchi tizimli guruhga aloqadorligini aniqlang, shuningdek ularning chegaraga chidamliligini aniqlang, bu bakteriologik kuzatish usuliga imkon beradi. 3-bosqich - antibiotiklar, tobto. yangi paydo bo'lgan muhitda dorilar o'rniga dori vositalarining ongida bakterial hujayralarning xatti-harakatlarini tahlil qilish.
Madaniyatning barqarorligini antibiotikga ko'tarish, agar ma'lum bir bemor uchun zarur bo'lgan dori-darmonlarni va smut preparatlarini buyurish kerak bo'lsa, amaliy ahamiyatga ega bo'lishi mumkin. Bu erda siz bakteriologik kuzatish usuliga yordam bera olasiz.
Hayot beruvchi markaz nima?
Rivojlanish uchun bakteriyalarning ko'payishi yashash muhitining uzoq tayyorgarliklarida bo'lishi kerak. Konsistensiya uchun hid kamdan-kam uchraydigan yoki qattiq bo'lishi mumkin, va sarguzashtlar uchun - o'sayotgan yoki mavjudotlar.
Hayot beruvchi vositalar uchun asosiy vimogi:
1. Sterillik.
2. Maksimal shaffoflik.
3. Kislota, suv faolligi va boshqa biologik qiymatlarning optimal ko'rsatkichlari.
Izolyatsiya qilingan koloniyalarni olib tashlash
1. Drigalskiy usuli. Vín har xil turdagi mikroorganizmlarga ega bo'lgan smear bakterial halqaga qo'llanilishi. Ilgakni hayot beruvchi vosita bilan birinchi Petri idishidan o'tkazing. Keyin, pastadirni o'zgartirmasdan, boshqa va uchinchi Petri idishlarida bajarish uchun ortiqcha material usulidan foydalaning. Shunday qilib, qolgan bakteriyalar koloniyalarida juda yaxshi o'sish shart emas, ular robot bakteriyalar uchun zarur sharoitlarni bilishlari mumkin bo'ladi.
2. Kox usuli. Yangi vikoristda eritilgan hayot beruvchi muhitga ega probirkalar mavjud. U erda bakteriya smetasi bo'lgan pastadir yoki pipetka qo'yiladi, shundan so'ng probirka o'rniga u maxsus plastinkaga siljiydi. Agar (yoki jelatin) bir soat ichida ushlanib qoladi va yogada hujayralarning kerakli koloniyalarini ko'rish oson. Mikroorganizmlar kontsentratsiyasi yanada ko'proq bo'lishi uchun probirkalardagi bakteriyalar yig'indisini kobdan oldin yoyish muhimdir.
Ko'rilgan mikroblarning kerakli madaniyati bo'yicha bunday poydevorning bosqichlarini koloniyalarni izolyatsiya qilishning ushbu ikki usulisiz amalga oshirib bo'lmaydi.
Antibiotikogramma
Vizual ravishda, bakteriyalarning dorilarga javobini ikkita amaliy usulda o'lchash mumkin:
1. Qog'oz disklar usuli.
2. Mahalliy muhitda bakteriya va antibiotiklarni ko'paytirish.
Qog'oz disklari usuli mikroorganizm madaniyatining ko'rinishini yaxshilaydi, chunki u qattiq jonlantiruvchi muhitda o'stirilgan. Bunday o'rta joyga antibiotiklar bilan namlangan yumaloq shakldagi papirtlarning spratini qo'ying. Natijada, preparat bakterial hujayralarni zararsizlantirish bilan muvaffaqiyatli kurashadi, bunday o'rim-yig'imdan keyin axlat bo'sh bo'ladi, koloniyalar saqlanib qoladi. Agar antibiotikga reaktsiya salbiy bo'lsa, bakteriyalar omon qoladi.
Viktoriya davrida noyob hayot beruvchi vosita, naslchilikning turli bosqichlarida bakteriyalar kulturasi bo'lgan probirkalar shpratlari tayyorlanadi. Namuna naychalariga antibiotiklar qo'shing va nutq va mikroorganizmlar o'rtasidagi o'zaro ta'sir jarayonini kuzatib boring. Antibiotikogrammani ko'rish xavfsiz, bu madaniyat uchun preparatning samaradorligini baholash uchun ishlatilishi mumkin.
Tahlilning asosiy vazifalari
Bu erda ular maqsad nuqtalari va kuzatishning bakteriologik usuli bosqichi uchun reabilitatsiya qilinadi.
1. Bakteriyalar koloniyalarini ko'rish uchun g'olib bo'lgan materialni olib tashlang. Bundan tashqari, siz ob'ekt yuzasidan, shilliq qavat yoki odamning bo'sh organidan smear, qon testidan foydalanishingiz mumkin.
2. mustahkam hayot beruvchi muhitda. 24-48 yildan keyin Petri kosasida har xil turdagi bakteriyalar koloniyalarini topish mumkin. Morfologik va / yoki biokimyoviy mezonlar uchun Vídbiraemo, men kerak bo'ladi va u bilan keyingi ishlarni amalga oshiradi.
3. To'ldirilgan madaniyatni ko'paytirish. Kuzatishning bakteriologik usuli bakteriya madaniyati sonini ko'paytirishning mexanik va biologik usuliga tayanishi mumkin. Birinchi bosqichda robot qattiq va noyob hayot beruvchi muhit bilan amalga oshiriladi, ularda bakteriyalar ko'payadi va termostatda yangi koloniyalar o'rnatadi. Tabiiy aqllarga yordam berishning biologik usuli bakteriyalar sonini ko'paytiradi, keyin bu erda keyingi mavjudot mikroorganizmlar bilan kasallanadi. Qon namunasi yoki smeardagi qon sprati orqali anonim prokaryotlarni aniqlash mumkin.
4. Sof madaniyat bilan ishlash. Bakteriyalarning tizimli holatini, shuningdek, ularning tibbiyot xodimlariga tegishliligini aniqlash uchun morfologik va biokimyoviy belgilar uchun hujayralarni takroriy tahlil qilish kerak. Mikroorganizmlarning rivojlangan patogen guruhlari bo'lsa, antibiotiklar uchun qanchalik samarali ekanligini bilish muhimdir.
Bu bakteriologik kuzatish usulining muhim xususiyati edi.
Tahlilning xususiyatlari
Bakteriologik tekshiruvni o'tkazishning asosiy qoidasi maksimal sterillikdir. Probirkalar bilan robotga kelsak, bakterial aybdor peressyvannya faqat isitilgan spirtli vannalar ustida amalga oshiriladi.
Kuzatishning bakteriologik usulining Usi bosqichlari paster pipetkasining maxsus halqasidan foydalanishni talab qiladi. Buzg'unchi asboblarni ruhlarning yarmida oldinga yuvish mumkin. Pasteur pipetkasidan foydalanish bilanoq, termal sterilizatsiyadan oldin pipetkaning uchini pinset bilan silkitish kerak.
Sivbi bakteriyalarining texnikasi ham o'ziga xos xususiyatlarga ega. Birinchidan, qattiq yadroda sivbí bilan agar yuzasida bakterial halqa o'tkazing. Loop, shubhasiz, allaqachon mikroorganizm yuzasida onaning aybi. Petri kosasining tubiga yetib borish uchun o‘rta va to‘g‘ri yo‘nalishda halqa yoki pipetka ekish ham mashq qilinadi.
Noyob muhitlar bilan ishlash soati ostida sinov naychalari g'alaba qozonadi. Bu erda uni ushlab turish muhimdir, shunda qirralarning laboratoriya idishlari yoki tiqinlar chetiga yopishib qolmasligi va g'alaba qozongan asboblar (pipetka, halqa) bu sirtdagi begona narsalarga yopishib qolmasligi kerak.
Kuzatishning biologik usulining ahamiyati
Bakteriyalarning namunaviy tahlili amaliy bo'lishi mumkin. Nasamperli bakteriologik usul tibbiyotda kuzatilishi mumkin. Masalan, to'g'ri tashxis qo'yish va davolanishning to'g'ri o'tishini singdirish uchun bemorning mikroflorasini tebranish kerak. Bu erda antibiotikogramma yordam beradi, chunki u kasallikka qarshi dorivor vositalarning faolligini ko'rsatadi.
Sil, tif yoki gonoreya kabi xavfli kasalliklarni davolash uchun laboratoriyada bakteriyalarni tahlil qilish g'alaba qozonadi. Shuningdek, sharob bodom bezlari, bo'sh organlarning bakterial omborini etishtirish uchun zastosovuêtsya hisoblanadi.
Muhitning zo'ravonligini aniqlash uchun kuzatuvning bakteriologik usulidan foydalanish mumkin. Har qanday ob'ekt yuzasidan smearning kilkisny va yakísny ombori haqidagi ma'lumotlarning orqasida mikroorganizmlar tomonidan ushbu muhit populyatsiyasining bosqichlari ko'rsatilgan.
Usulning mohiyati patologik materialdan mikrob - tibbiyot xodimining sof madaniyatini kuzatish, ishchini keyingi aniqlash usulidan morfologik, tinktorial, madaniy, biokimyoviy, serologik organlarni etishtirish bo'yicha hisobot. Bakteriologik usulni qo'llashda 4 bosqich ko'rinadi.
Bakterioskopik kuzatuv bilan olib tashlangan sog'lom ma'lumotlar, eng samarali yashash muhitini tanlash imkoniyati mavjud bo'lib, ular uchun eng ko'p chastotada mikroblarni ko'chirish madaniyatining o'sishiga g'amxo'rlik qilish mumkin - hushyorlar.
B. Viroblyaetsya posyv doslydzhuvannogo jonli o'rta bir qator moddiy: kamdan-kam va schylnyh, universal, selektiv-selektiv, differensial-diagnostik. Ishqoriy hayot beruvchi muhit bilan Petri idishlariga ekishda mikroblarning bir koloniyasining bir turini izolyatsiya qilish imkoniyatini ta'minlash uchun insult bilan bakteriologik halqa bilan amalga oshiriladi (uni boshqa usul yordamida ham etishtirish mumkin). o'sib borayotgan madaniyatlar
A. Viruslarning madaniy kuchi mikroorganizmlarning hayot beruvchi muhitlarida o'sadi; gumon qilingan koloniyalar orqali o'tish. Keyingi qadam, shubhali koloniyalarni tanlash ishning eng muhim va eng muhim bosqichi ekanligini aytishdir. M_Krob_v koloniyasining xususiyatlarining Nasampeed Vín xususiyatlari, Ale, ko'pincha, Dzvolzíyuvati to'plamlarining dozasi emas Mikrovíva oremix i i i i Dadatovodova ivivatoriya morfoliyu ikrokiva pokakiki Zídozzíyuvati ikrokiva pokaki Pídozístariotívítí. Bakteriyalarning sof madaniyatini ko'rish va yogo o'sishi noyob to'planish muhitida oldinga ekish orqali amalga oshirilishi mumkin va shundan so'ng qo'shimcha bir soatlik kuzatuv kuzatiladi.
B. Shubhali koloniyalardan bakteriologik smeta tayyorlanadi, so'ngra Gram va mikroskopiya o'tkaziladi (mikroorganizmlarning kultura bilan bir xilligi 1-bosqichda mikroskopik kuzatishda aniqlanadi).
C. Yetuk koloniyaning uchinchi qismida kultura qiyshiq go'sht-peptonli agarga o'tkaziladi (vikoratsiya va boshqa tirik muhitlar, ularda mikroorganizmlarning ko'rinishi yaxshi o'sadi). Maqsad, mikrobning sof madaniyatini to'plash - kasal bo'lgan bemor, tk. kuzatuvning keyingi bosqichida sizga boy mikrobial massa kerak.
Ishchining saxarozasi tsukrolitik kuchga ega (Olkenitskiy, Ressel va in. chizig'ining o'rta chizig'ida tebranadi), proteolitik faollikka ega (Tukaevning fikriga ko'ra jelatin, sut ekish, oyda o'sishda indol va sirkovodni qabul qilishni belgilaydi. .). Ko'rish madaniyatining antibiotiklarga nisbatan sezgirligi kuzatiladi (ko'pincha standart qog'oz disklar usuli bilan, ko'pincha ketma-ket naslchilik usuli bilan). Serotiplash guruh va tipik diagnostik sirowortlar bilan sklerozda aglutinatsiya reaktsiyasida yuzaga keladi; standart diagnostik bakteriofaglar bilan fag tiplash. Muayyan turdagi patogenlarni aniqlash uchun bakteriyalarda patogenlik agentlari tekshiriladi.
Tergov natijalarining ko'rinishi ishlab chiqilmoqda. Z porívnyannya vyavlenyh mikroorganizm iv yaskostv (morfologik, tinctorial, madaniy, biokimyoviy, serologik va boshqalar) zdyysnyue ídentifíkatsíya bakteriyalar. Bakteriologik tekshirish natijalari bilan hasharot turi (bir xil serotip, biovar, fag turi) va antibiotiklarga sezuvchanligi bilan bog'liqlik qoldiq ko'rinadi.
O'zgarishlar, biologik, allergologik va boshqa kuzatuv usullari shaklida ishonchli natijalar haqida tez-tez hisobot berish.
Bakteriologik diagnostika usulining afzalliklari : kuzatuv natijalarining yuqori ishonchliligi; tibbiy xodimlarning antibiotiklarga sezgirligi haqida qo'shimcha ma'lumotlarni olish imkoniyati; epidemiologik tadqiqotlar o'tkazish imkoniyati.
