• Кесарів розтин
• Календар щеплень
• Аналізи крові
• Післяпологовий період
• Підготовка до пологів

Поживне середовище з еозин-метиленовим синім для виділення та диференціації ентеробактерій (Середовище Левіна). Середа левіна-грм оболенськ Iv

** Склад вивірено та доведено до відповідності необхідним параметрам

Приготування:

Розмішати 37,5 г порошку М022 або 27,5 г порошку М301 у 1000 мл дистильованої води. Прокип'ятити для повного розчинення частинок. Додати відповідний вуглевод до Основи агару Левіна (М301) перед стерилізацією. Стерилізувати автоклавування при 1,1 атм (121°С) протягом 15 хв. НЕ ДОПУСКАТИ ПЕРЕГРІВАННЯ СЕРЕДОВИЩА. Остудити до 50 ° С і струсити для окислення метиленового синього (щоб відновити його синій колір і розмішати пластівцевого преципітату). Якщо середовище використовується того ж дня, його можна не автоклавувати.

Попередження: середу треба зберігати в темряві, щоб не допустити її окиснення на світлі.

Принцип та оцінка результату:

Це середовище розроблено Levine (1, 2) і використовується для диференціації Escherichia coliі Enterobacter aerogenes, а також для швидкої ідентифікації грибів Candida albicans. Американські фахівці рекомендують це середовище для виділення, підрахунку та диференціації грамнегативних мікроорганізмів кишкової (коліформної) групи (3, 4, 5).

Метиленовий синій та еозин певною мірою пригнічують зростання грампозитивних мікроорганізмів. Дані барвники служать диференціюючими індикаторами ферментації лактози. На цьому середовищі можуть виростати у вигляді точкових колоній дріжджі та деякі грампозитивні бактерії, наприклад, ентерококи. Weld (6, 7) запропонував використовувати агар Левіна з додаванням хлортетрацикліну гідрохлориду для швидкої ідентифікації грибів Candida albicansу клінічному матеріалі. Виявлення цих грибів у такому матеріалі, як фекалії, оральний та вагінальний секрет, нігті, лусочки шкіри та іншому можливе через 24-48 год інкубування при 35-37°С в атмосфері, що містить 10% вуглекислого газу. Проте культуральні властивості грибів у своїй варіюють.

Контроль якості:

Зовнішній вигляд порошку:

Гомогений сипкий світло-ліловий порошок.

Щільність готового середовища:

Утворюється середовище, що відповідає за щільністю 1,5% агарового гелю.

Колір та прозорість готового середовища:

Готове середовище має червонувато-лілове забарвлення, опалесціює із зеленуватим відтінком і легким преципітатом, якщо у чашках Петрі формується гель.

Кислотність середовища:

При 25°С водний розчин М022 (3,75% вага/про) має рН 7,1±0,2, водний розчин М301 (2,75% вага/про) має рН 7,3±0,2.

Культуральні властивості:

Ростові характеристики референс-штамів через 24-48 год. при 35-37°С.

Левина-ГРМ Оболенск Поживне середовище з еозин-метиленовим синім для виділення та диференціації патогенних та умовно патогенних ентеробактерій, а також для виділення стафілококів, сухе.

Ціна за пакування 0,25 кг

ІНСТРУКЦІЯпо застосуванню живильного середовища з еозин-метиленовим синім сухим.Середа Левіна-ГРМОболенськ

1. ПРИЗНАЧЕННЯ

Середовище Левіна-ГРМ Оболенск призначено для бактеріологічних досліджень у санітарній та клінічній мікробіології з метою виділення та диференціації патогенних та умовно патогенних ентеробактерій, а також для виділення стафілококів.

1. характеристика

Середовище Левіна-ГРМ Оболенск є дрібнодисперсним, гігроскопічним, світлочутливим порошком світло-бузкового кольору.

Випускається у поліетиленових банках по 250 г.

2.1. ПРИНЦИП ДІЇ

Наявність серед еозину і метиленового синього надають їй селективні властивості.

Диференціююча здатність середовища заснована на зміні рН середовища під дією кислоти, що утворюється при ферментації лактози бактеріями. Комплекс індикаторів у кислій зоні забарвлює колонії кислотоутворюючих бактерій у темно-фіолетовий колір, деякі колонії мають зелений металевий блиск.

2.2. СКЛАД

Середовище Левіна-ГРМ Оболенск є сумішшю сухих компонентів з розрахунку, г/л:

1. АНАЛІТИЧНІ ТА ДІАГНОСТИЧНІ ХАРАКТЕРИСТИКИ

Середовище Левіна-ГРМ має забезпечувати на всіх засіяних чашках Петрі зростання тест-штамів Shigella flexneri 1a 8516 та Escherichia coli 168/59 (O111:K58) через 18-20 год інкубації при температурі (37±1) °С, при посіві 1 мл мікробної суспензії культури кожного тест-штаму з розведення 10 -7 і зростання тест-штаму Staphylococcus aureus 209-P (АТСС 6538-Р) через 48 год інкубації при температурі (37±1) °С при посіві по 0,1 мл мікробної суспензії культури тест-штаму з розведення 10 -5 .

Диференціюючі властивості середовища. Поживне середовище має забезпечувати чітку диференціацію шигел від ешерихій на всіх засіяних чашках при посіві по 0,1 мл мікробної суміші S. flexneri 1a 8516 та E. coli 168/59 (O111:K58) з розведення 10 -6 (в: ) через 18-20 годин інкубації при температурі (37±1) °С.

1. ЗАПОБІЖНІ ЗАХОДИ

Потенційний ризик застосування живильного середовища відповідно до Наказу
МОЗ РФ №4н від 06.6.2012 - клас 2а.

1. ОБЛАДНАННЯ І МАТЕРІАЛИ

• Термостат, що забезпечує температуру 37±1 °С
• Ваги лабораторні 2 класу точності
• Автоклав
• Пробірки скляні
• Піпетки скляні, що дозволяють відбирати обсяги рідини 1 і 2 мл.
• Циліндр скляний мірний місткістю 1000 мл
• Чашки Петрі стерильні
• Вода дистильована
• Колби
• Вирви скляні

1. АНАЛІЗОВАНІ ЗРАЗКИ

Об'єкти досліджень у клінічній лабораторній діагностиці (кров, жовч, сеча, гній тощо).

1. Проведення аналізу

Дослідження проводять за умов бактеріологічної лабораторії медичними фахівцями.

7.1. Приготування середовища Левіна-ГРМ Оболенськ.

Порошок у кількості, вказаній на етикетці для приготування конкретної серії живильного середовища, розмішують в 1 л дистильованої води, кип'ятять протягом 3 хв, фільтрують через ватно-марлевий фільтр і стерилізують автоклавуванням при температурі 110 ° С протягом 20 хв. Стерильне середовище охолоджують до температури
45-50 ° С, розливають у стерильні чашки Петрі шаром 5-6 мм. Після застигання середовища чашки підсушують за температури (37±1)°С протягом 40-60 хв. Готове середовище в чашках Петрі прозоре, від світло-бузкового до червонувато-коричневого кольору.

Стерильне середовище можна використовувати протягом 3-х днів за умови зберігання при температурі 2-8 °C.

7.2. Взяття, посів інфікованого матеріалу та облік результатів виробляють відповідно до “Методичними вказівками з мікробіологічної діагностики захворювань, викликаних ентеробактеріями” (М., 1984 р) та наказом МОЗ СРСР від 22.04.85 р., № 535 “Про уніфікацію мікробіологічних методів дослідження, що застосовуються у клініко-діагностичних лабораторіях лікувально-профілактичних установ”.

7.3. Досліджуваний матеріал стерильним шпателем ретельно втирають у всій поверхні середовища. Інкубують при температурі (37±1) °С протягом 46-48 год.

1. РЕЄСТРАЦІЯ І ОБЛІК РЕЗУЛЬТАТІВ

Через 18-20 годин інкубації при температурі (37±1) °С візуально враховують характер росту культур S. flexneri 1a 8516 та E.coli 168/59 (O111:K58) та через 46-48 год характер зростання культури S.aureus 209 -P (АТСС 6538-Р).

Колонії S.flexneri 1a 8516 мають бути круглими, прозорими, безбарвними або слабо-рожевими, діаметром 1,0-1,5 мм.

Колонії E.coli 168/59 (O111:K58) повинні бути круглими, темно-фіолетового кольору із зеленим металевим блиском (можлива наявність окремих колоній без металевого блиску), діаметром 1,5-2,0 мм.

Колонії S. aureus 209-P (АТСС 6538-Р) повинні бути круглими, безбарвними або світло-фіолетовими з темним центром діаметром до 1,0 мм.

1. УТИЛІЗАЦІЯ

Утилізація серій середовища Левіна-ГРМ Оболенськ зі строком придатності, що минув, проводиться за
СанПіН 2.1.7.2790-10 як медичні відходи, що належать до класу "А" - епідеміологічно безпечні відходи.

Знищення середовища Левіна-ГРМ після проведення біологічного контролю здійснюється за СанПіН 2.1.7.2790-10 як медичні відходи, що належать до класу "Б" з обов'язковим попереднім знешкодженням шляхом автоклавування протягом 2 годин при температурі (133±1) ˚С.

Поводження з медичними відходами слід виконувати згідно зі схемою, прийнятою в конкретній організації, що здійснює медичну та (або) фармацевтичну діяльність. Дана схема розробляється відповідно до вимог вищезазначених санітарних правил та затверджується керівником організації.

1. УМОВИ ЗБЕРІГАННЯ І ЕКСПЛУАТАЦІЇ

Склад (у перерахунку на 1 л готового середовища):

Пептон ферментативний, сухий – 10,0 г.
Екстракт автолізованих дріжджів освітлений – 1,5 г.
Лактоза – 10,0 г.
Натрій фосфорнокислий двозаміщений – 2,0 г.
Агар мікробіологічний – 13,0 г.
Натрію хлорид – 3,0 г.
Еозин натрію, індикатор – 0,4 г.
Метиленовий блакитний, індикатор – 0,075 г.

Щільне живильне середовище для виділення та диференціації ентеробактерій з досліджуваного матеріалу за ознакою ферментації лактози.

Суху середу в кількості 40 г розмішати в 1 л очищеної води, довести до кипіння і кип'ятити до повного розплавлення агару (2-3 хв), профільтрувати через ватно-марлевий фільтр, Розлити в стерильні пляшки і стерилізувати автоклавуванням при температурі 112 оС хв. Стерильне середовище охолодити до температури 45-48оС і розлити у стерильні чашки Петрі; після застигання агару підсушити чашки за температури 37оС протягом 40-60 хв. Колір готового середовища має бути червонувато цегляний.

Готове середовище до використання можна зберігати в темному місці не більше 7 діб за температури 2-8°С.